开题报告内容：
[研究的主要目的和意义]
羧肽酶催化链是一个酶人类是由CPN1编码基因.[1][2][3]羧肽酶N是等离子metallo-protease劈开基本的C末端氨基酸多肽和蛋白质。调节肽的酶是重要的细胞分裂素和过敏毒素,也被称为kininase-1和过敏毒素抑制剂。这种酶是四聚物组成的两个相同的管理单元和两个相同的催化亚单位;这种基因编码催化亚单位。这个基因的突变可以与血管性水肿或羧肽酶N不足所导致的慢性荨麻疹。[3]melanocytic细胞CPN1基因表达可能是受MITF.[4]
hMGH蛋白是利用基因工程原理，[5]以质粒为载体,将一段人源目的基因CPN1（[6]羧肽酶N催化链）通过转化的方法导进大肠杆菌所表达出来的抗原蛋白，其中CPN1的序列为GIKGMVLDENYNNLANAVISVSGINHDVTSGDHGDYFRLLLPGIYTVSATAPGYDPETVTVTVGPAEPTLVNFHLKRS
[7]单克隆抗体问世以来，由于其独有的特征已迅速应用于医学很多领域。作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。[8][9][10]单克隆抗体的检测可采用沉淀反应、凝集反应、补体参与抗原抗体反应等多种方法。本课题将在hMGH蛋白单克隆抗体的抗原准备、动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞培养、分离纯化基础上完成该抗体ELISA检测鉴定及应用研究。
[课题的可行性与创新性]
[11][12]酶联免疫吸附试验 (ELISA) 是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( [13]聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。ELISA检测方法具有灵敏度高、最小检测限低的优点，且一次能处理多个样本，基本能够满足实验的要求。ELISA检测具体又分为很多种，[14]有用于检测抗原的双抗夹心法；[15]检测抗体最常用的为间接法；竞争法ELISA既可以用来检测抗原，也可以用来检测抗体；测定IgM标本多用捕获法；另外还有应用亲和素和生物素的ELISA。
[拟研究或待解决的问题]
定性定量检测hMGH蛋白单克隆抗体，研究该单抗应用前景。
[采用的研究手段及文献综述]
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