TROP2 蛋白表达检测（全自动免疫组织化学法）方法学建立及相关临床意义分析一. 拟研究或解决的问题在实验室的 Ventana BenchMark XT/ULTRA 全自动免疫组化染色仪平台上对 TROP2（EPR20043）（全自动免疫组织化学法）检测方法学进行验证，主要针对以下几个性能进行验证：质控样本的选择、病理医生判读培训、病理医生判读的一致性、批间及批内重复性、仪器间对比、检测的特异性，证明中心实验室在 Ventana BenchMark XT/ULTRA 全自动免疫组化染色仪平台上对 TROP2（EPR20043）（全自动免疫组织化学法）进行检测的性能指标达到临床样本检测的要求。
二. 采用的 研究 手段TROP2蛋白检测通过免疫组化的技术来检测福尔马林固定的组织样本中TROP2蛋白在细胞中的表达情况。
染色片子通过病理医师镜下观察根据染色比例和染色强度来评价表达情况，判断肿瘤细胞的染色指数(SI)。
三. 检测方法 流程 1. HE染色和病理评估:样本各取一张 FFPE 片子进行 HE 染色，HE 染色按照《HE 染色作业指导书》（LAB-TM-SOP001）进行操作，样本经 HE 染色后由病理医生评估样本中肿瘤细胞情况。
2. 在BenchMarkXT/ ULTRA全自动免疫组化仪上进行TR OP2实验 ， 实验步骤如下： 2.1 样本预处理 （1）将切片放入恒温箱中烤片，65℃孵育半小时（烤片温度可接受3C 的波动）； （2）取出切片，冷却至室温； （3）向 200mL 超纯水中加全脂奶粉 20g 配置成 10%的牛奶，把切片放入浸泡 10min； （4）用超纯水冲洗切片； （5）用吸水纸将切片表面的水轻轻吸干。
2.2 设定实验方案 （1）开启仪器相关电脑，打开 Ventana 软件，检测人员使用个人账号登录软件，点开新的实验方案； （2）根据预实验结果设定本方案，并保存。
2.3 打印标签 （1）开启标签打印机，选择该检测方法对应的实验方案，打印样本相应数量的标签； （2）将标签粘贴在样本载玻片的前端，尽量与边缘对齐。
2.4 运行程序 （1）开启全自动免疫组化仪，将样本载玻片放置于样本盒的卡槽内，关闭样本盒； （2）将实验方案涉及到的试剂装载到仪器上，并检查辅助试剂剩余量，确保足够运行该数量的样本； （3）点击 Ventana 软件上的Run，运行程序。
2.5 清洗封片 （1）程序运行结束后，将样本载玻片取出，用洗洁精清洗样本表面油膜一分钟； （2）依次用 75%、95%、100%乙醇浸泡 2 分钟，再使用二甲苯浸泡 5 分钟，使用中性树脂封片，镜下观察拍摄。
