不同类型的整合酶Caposase的异源表达、纯化及结构解析文献综述

 2023-02-10 01:02

不同类型整合酶Caposase的异源表达、纯化及结构解析一、研究背景CRISPR/Cas系统是一种原核生物的免疫系统,用来抵抗外源遗传物质的入侵,比如噬菌体病毒和外源质粒。

CRISPR-Cas系统在许多细菌和古细菌物种的基因组中编码,免疫反应的第一步包括提取一小段外来核酸,并将这些DNA片段(或间隔子)存档在CRISPR基因座上,在此处它们与宿主特异性repeats交替出现。

然后CRISPR基因座转录为长CRISPR RNA(pre-crRNA),然后将其消化成较短的片段(crRNAs)。

这些指导 crRNA被掺入到核糖核蛋白干扰复合物中,该复合物可以识别并切割其互补靶序列,从而破坏入侵的核酸。

在所有已知的自主CRISPR-Cas系统中,共同存在的是Cas1蛋白,该蛋白与其结合伴侣Cas2协同作用以识别加工,并将原间隔子整合到CRISPR-Cas基因座中。

(Yosef et al., 2012; Nunez et al., 2014). Casposase是一类由细菌和古生菌中新发现了一类转座子(Casposon)所编码的,与Cas1蛋白具的有一定同源性的整合酶。

目前依据不同类型Casposon的所含基因,生物学分类及其与Cas1的同源关系可将其大致分为3个家族。

现阶段的研究重要集中在C端具有HTH(helix turn helix)结构域的2型家族。

这类家族对一系列底物有良好的整合活性。

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