比格犬感染病毒的实验室检测一、 实验背景实验动物是生命科学研究的基础和条件, 实验动物的质量直接影响众多领域科学实验的准确性, 也关系到实验动物从业人员和动物实验操作者的健康[1]。
因此, 实验动物的质量控制成为制约性要素, 实验动物的微生物、寄生虫质量控制显得尤为重要。
目前, 实验动物微生物学等级及监测国标GB 14922.2-2011, 针对细菌检测推荐的方法是病原菌的分离培养、生化鉴定, 但耗时长, 操作繁琐, 易受检测人员的主观判定干扰;针对病毒检测主要采取血清学方法检测, 但对于一些动物病毒呈周期性病毒, 在排毒的时候, 体内无抗体, 通过血清学方法检测, 就易造成假阴性。
针对寄生虫检测主要采用直接涂片法或饱和氯化钠漂浮法, 也受检测人员的判定干扰。
此外, 实验动物多采用群体饲养, 易被各种易感病原所感染, 从而导致疾病的爆发和流行, 严重影响经济效益, 并使公共卫生遭到威胁[2]。
因此, 建立一种快速、敏感、易于标准化操作的检测技术尤为重要。
PCR技术可以实现对病原微生物的检测, 具有高效、快速、经济简便等优点, 在临床上具有较高的应用价值。
PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应 (又称:多聚酶链式反应) ,是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。
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