中国每年因冠心病死亡的人数超过100万，深入研究冠心病的发生机制和干预策略，对减少冠心病事件具有重要意义。
近年来，有研究发现N-乙酰神经氨酸（Neu5Ac）是冠心病的潜在代谢标志物，其在血浆中的水平与冠心病事件呈显著正相关;并通过功能代谢组学研究发现Neu5Ac可选择性结合Rho家族中的RhoA和Cdc42，通过激活Rho-ROCK信号通路诱发心肌损伤;后续通过分子、细胞和动物水平的深入探索，发现敲除Neu5Ac上游调控蛋白神经氨酸酶（Neu1）或使用流感病毒神经氨酸酶抑制剂药物如奥司他韦，可以有效减少心肌细胞损伤和大鼠心肌缺血损伤。
这一结果揭示了神经氨酸酶可作为冠心病候选治疗新靶点。
本课题拟通过同源模建筛选Neu1抑制剂，并通过体内外动物模型验证其药效，以期得到先导化合物。
研究方法运用同源模建首先筛选出可能对心肌保护有效的Nue1抑制剂，后通过体内外实验验证其药效；（1）体外实验：用前述筛选所得抑制剂0.2mu;mol/L预处理新生大鼠心室肌细胞（NRVM），持续6小时，然后缺血4小时。
后用LC-MS测定NRVM中Neu5Ac浓度并检测NRVM细胞活力、状态以及NRVM中Rho-ROCK、MAPK和凋亡相关蛋白的代表性免疫印迹分析；（2）体内实验：用筛选所得抑制剂在指定剂量下对大鼠进行预处理，然后对异丙肾上腺素(ISO)和结扎诱导的急性心肌缺血模型进行预处理。
后分别测得各组血清中Nue5Ac浓度、心脏Nue1活性、心脏组织状态并做血液动力学分析和心脏组织中Rho-ROCK、MAPK和凋亡相关蛋白的代表性Westernblotting分析。
文献综述一、Nue1概述及相关研究唾液酸（sialic acid，SA）是一类带负电荷的9碳糖化合物，广泛存在于生物体内,目前已知的唾液酸有50多种【1】，具有组织、细胞特异性并发挥不同生物学功能，除了调控发育相关过程和作为某些病毒和病原微生物受体的作用靶点外，还与多种疾病有着密切关系。
如刘昌梅等研究发现，膀胱癌细胞中唾液酸的含量也明显高于膀胱正常细胞【2】；唾液酸还与许多CAD危险因素有关，例如血脂异常，胰岛素抵抗和免疫反应【3】。
