鲁斯可皂苷元对氧糖剥夺诱导的脑微血管内皮细胞损伤的保护作用研究文献综述

 2023-02-15 07:02

拟研究的问题:传统医学认为,中药是在中医治则指导下防病治病的主要形式,蕴涵着丰富的理论内涵,其作用特点与基于现代医学理论的化学药有不同之处。

中药麦冬性甘、微苦、微寒,主入肺、胃、心经,具有养阴润肺,益胃生津,清心除烦等功效,也是著名古方生脉散主要组成之一,鲁斯可皂苷元是从植物麦冬中提取分离得到的具有较强的抗炎、抗血栓活性的皂苷类化合物,是麦冬发挥药理学活性作用的主要活性成分,也是生脉制剂的有效成分。

已有文献以及本课题组前期研究结果表明,鲁斯可皂苷元对小鼠脑缺血再灌注引起的脑损伤具有保护作用,其作用途径可能与通过抑制核转录因子激活进而减轻炎症反应有关,但是否对氧糖剥夺诱导的脑微血管内皮细胞损伤具有改善作用尚未明确。

基于以上背景,本课题拟考察鲁斯可皂苷元对氧糖剥夺诱导的脑微血管内皮细胞损伤的影响,并初步探讨可能的作用机制,为鲁斯可皂苷元用于防治缺血性脑中风提供进一步的实验依据。

采用的研究手段:本实验拟采用氧糖剥夺6小时,再复氧18小时(OGD/R)诱导的小鼠微血管内皮细胞损伤模型,考察给予鲁斯可皂苷元(0.1-10 mu;M)对bEnd.3细胞活力、跨内皮电阻值(TEER)、荧光素钠渗漏率(NaF)等指标以及紧密连接蛋白表达的影响。

(一) 采用MTT法考察鲁斯可皂苷元对bEnd.3细胞活力的影响各组细胞在氧糖剥夺6 h,再复氧18 h后,按照MTT法步骤测得每组的OD值,计算出各组细胞的存活率,并作图。

(二) 采用TEER法考察鲁斯可皂苷元对bEnd.3细胞跨内皮电阻值的影响各组细胞在氧糖剥夺6 h,再复氧18 h后,按照TEER法步骤测得每组的TEER值,然后根据这些值作图。

(三) 采用荧光素钠法考察鲁斯可皂苷元对bEnd.3细胞荧光素钠渗漏的影响各组细胞在氧糖剥夺6 h,再复氧18 h后,按照荧光素钠法步骤测得每组的OD值,计算出各组细胞的渗漏率后并作图。

(四) 采用Western blot技术以及免疫荧光法考察鲁斯可皂苷元对bEnd.3细胞荧光素的渗漏的影响各组细胞在氧糖剥夺6 h,再复氧18 h后,采用Western blot技术以及免疫荧光法步骤考察脑组织中ZO-1,Occludin等蛋白的表达情况。

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