研究和解决的问题:
本次实验的目的是优化中药金钗石斛在植物反应器中的培养条件,主要的变量是:培养基的糖浓度:设定的梯度是0g/L、10g/L、 30g/L、 50g/L;培养液的浸没频率:5min/1h、5min/4h、5min/8h、5min/12h;接种量:1g、5g、10g、15g。培养基每个反应器1L。以质量为单位进行接种,遇到的问题主要是愈伤组织大小不一,所以在质量(biomass)相同时,植株的数量是不一样的。所以在进行同一变量实验时,应当尽量接种形状、大小均一的金钗石斛的愈伤组织或小植株。在1L的培养基中,接种量少生产效率太低,接种量多营养容易缺乏,所以摸索接种量对生产很是重要。以min/h为单位,在接种量相同时,浸没频率越高,营养越丰富。当然太过丰富的营养也会让植株玻璃化。作为培养基众多成分中的一种,糖在其中提供碳源。本实验就糖的浓度设计了4个梯度(包括无糖实验一组),查看糖对金钗石斛的影响。
采用的研究手段:
本次实验采用的方法是控制变量法,即在糖浓度试验中控制浸没频率为5min/4h,接种量为10g。所以从组别上用10组实验,30个反应器罐体。在光照2000lux,光照时常12h/24h,温度231℃的培养条件下培养3个月,在3个月内每周记录生长,并在90天左右取出,测定蛋白质、多糖以及生物碱,比较产率以及产量,选择最佳的培养条件。
摘要:
金钗石斛Dendrobium nobile是兰科石斛属的主要代表种之一,与其相并列的还有铁皮石斛等,而金钗石斛则是最早被确定下来的石斛品种,因其形似金钗,故名之。现代医学研究表明,金钗石斛中含有蛋白质、多糖、生物碱、联苯、菲类等有效成分,具有抗肿瘤、调节免疫、降低血糖、抗白内障等生理作用。其组织中这些有效成分的含量决定了金钗石斛的品质优劣。这些年来在生物反应器的大力发展的带动下,植物体外培养技术也得到长足的发展。近30年里,数种生物反应器被开发出来,从实验室小试到扩大规模生产都给了我们喜人的信号。而间歇浸没式反应器有其更独特的优势,这些内容将在下文中具体阐述。
Abstract:
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