课题名称 款冬花的止咳祛痰活性研究课题性质 radic; 基础研究 应用课题 □设计型 调研综述 理论研究 开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）一、拟研究的问题 对中药款冬酚酸类的化学成分进行富集，得到总酚酸部位，并对款冬总酚酸的止咳祛痰活性进行研究，为款冬花止咳祛痰活性提供物质基础和科学证明。二、研究手段 对款冬花采用70%乙醇提取，通过乙酸乙酯萃取得到总酚酸部位。通过小鼠氨水引咳实验和酚红排泌实验，对款冬总酚酸部位的止咳祛痰活性进行考察。三、文献综述 款冬花为菊科款冬Tussilago farara L. 的干燥花蕾,又称冬花、九九花等，主产于陕西、山西、河南、甘肃、青海、内蒙古等地，四川、河北、湖北、河南也产，以甘肃灵台、陕西榆林产品质量佳。款冬花味辛、微甘，性温，具有润肺止咳、化痰平喘的功效。 国内外现已报道的款冬花化学成分类型主要包括挥发油类、黄酮类、萜类、甾醇类、生物碱类和酚酸类等。其中挥发油类如1,3,5-cycloheptatrien、石竹烯[1]、丁基甲醚(n- butyl methylether)、壬烯(1- nonene)、1,10-十一二烯(1, 10- undecadiene)、alpha;-十一烯(alpha;- undecene)、beta;-红没药烯(beta;-bisabolene)、斯巴醇(spathulenol)等[2]；黄酮类包括槲皮素(Quercetin)、槲皮素-3- beta;-D-芸香糖苷(Rutin)、槲皮素- 3-0-芸香糖苷、槲皮素- 3-0-半乳糖苷(hyperoside)[3]和山柰酚-3-O-alpha;-L-鼠李糖-(1→6)-beta;-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-3-O-alpha;-L-rham nopyranosyl(1→6)-beta;-D-glucopyranoside)[4]、木犀草素(luteolin)、柯伊利素(chrysoeriol)、芹菜素-7-甲醚(apigenin-7-methylether)、芹菜素(apigenin )[5]；萜类包括款冬花酮(tussilagone)、新款冬花内酯、款冬二醇和山金车二醇(arnidol)，款冬巴耳新醇，巴耳三萜醇等；甾醇类如7-beta;-羟基谷甾醇、7-ɑ-羟基谷甾醇(sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、beta;-谷甾醇、豆甾醇-beta;-D-葡萄糖苷(stigmasterol-beta;-D-glucoside)[6]等；生物碱类包括双稠吡咯啶生物碱的肾形千里光碱(senkirkine)和千里光宁(senecionine)、克氏千里光碱[7]等；酚酸类包括咖啡酸(caffeic acid)，咖啡酸甲酯(methyl caffeate)，咖啡酸乙酯(ethyl caffeate)，(E)-2, 5-二羟基桂皮酸((E)-2,5-dihydroxy-cinnamic acid)，3,4-二咖啡酰基奎尼酸(3,4-dio-caffeoylquinic acid)，4,5-二咖啡酰基奎尼酸(4,5-dio-caffeoylquinic acid)，4, 5-二咖啡酰基奎尼酸甲酯(methyl 4,5-dio-caffeoylquinic acid)和绿原酸[4]等。 款冬在我国古代就有很多应用，是止咳要药。在《神农本草经》中记载：寒束肺经之饮邪喘、嗽最宜。《本经》中记载主咳逆上气善喘，喉痹，诸惊痫，寒热邪气，《药性论》中记载主疗肺气心促，急热乏劳，咳连连不绝，涕唾稠粘，治肺痿肺痈吐脓，《本草正义》中记载款冬花，主肺病，能开泄郁结，定逆止喘，专主咳嗽，性质功用，皆与紫菀绝似。所以《本经》主治，亦复多同，于寒束肺金之饮邪喘嗽最宜。然气味虽温，润而不燥，则温热之邪，郁于肺经而不得疏泄者，亦能治之，又如紫菀开肺，寒热皆宜之例。特比之紫菀，究是辛温一筹，则火邪郁结，如肺痈成脓，痰红臭秽之侯，自当有所顾忌。甄权竟谓其主肺痿肺痈，而景岳、石顽从而和之，殊是未妥。且石顽亦谓阴虚劳嗽忌之，以其性温也，何独于肺痈而不畏其温？要之，其功用大纲，多似紫菀。气味虽温，润而不燥，则温热之邪，郁于肺经而不得疏泄者，亦能治之。故外感内伤、寒热虚实的咳嗽，皆可应用。特别是肺虚久咳不止，最为适用。现在主要用于治疗新久咳嗽、喘咳痰多、劳嗽咯血等证。 而现代研究表明，款冬的功效包括多个方面，且与其成分有密不可分的关系。 李一平等[8]证实，静脉注射款冬酮对麻醉犬、猫和大鼠有较强大的呼吸兴奋作用；应百平等[9]实验表明款冬酮有很强的升压作用，且与剂量有关；款冬花素(farfarat-in)被证实有升压作用，还有较强的抗血小板聚集作用[10]；朱自平等[11]证实，款冬花醇提物对蓖麻油、番泻叶所致的小鼠腹泻有一定的抑制作用；将款冬花醇提液从十二指肠给予麻醉大鼠，可产生弱小但持久的促进胆汁分泌作用；款冬二醇及山金车二醇是款冬花的抗炎活性成分，能对抗12-O-十四酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA) 和巴豆油引起小鼠耳肿，能显著对抗水浸应激性溃疡形成和盐酸性溃疡形成，抗炎活性与吲哚美辛相当，并且可抑制癌细胞生长[12]。 | 而款冬的主要药理活性为止咳祛痰，对其有效成分的研究也有一定的进展。高意琴等[13]证实款冬花对氨水引起的小鼠咳嗽有显著抑制作用；张巧珍等[14]通过对30%、50%、70%、90%四种浓度醇沉部位的氨水引咳实验结果比较得出，90%醇沉部分是对抗氨水引咳作用的有效部位；光若静[15]通过LC-MSn成分分析证实款冬止咳祛痰有效部分为主含酚酸类成分（绿原酸类和异绿原酸类）；汪玲等[16]通过给大鼠灌胃款冬有效部分后测血浆成分实验推测款冬止咳有效部分为异绿原酸类，并在大鼠体内代谢生成绿原酸；李震宇等[17]采用小鼠氨水引咳法和酚红排泌法建立止咳祛痰动物模型对款冬的不同器官进行药效学评价，并运用SIMCA-P11.0软件以偏最小二乘法（PLS-DA）对款冬的叶、花蕾、根代谢组学与止咳祛痰的药效学进行了相关性分析，分析的结果显示款冬中绿原酸、异绿原酸B、芦丁与其止咳祛痰的作用密切相关。参考文献 [1] 陈雪园, 张如松, 杨苏蓓. 款冬花化学成分及药理毒理研究进展[J]. 亚太传统医药, 2012, 8(1):173-174. [2] 吕培霖, 李成义, 翟丽芳. 款冬花化学成分和药理作用研究进展[J]. 中国药房, 2007, 18(12):948-949.[3] 石巍 高建军 韩桂秋. 款冬花化学成分研究[J]. 北京医科大学学报, 1996(4):308. [4] 吴笛, 张勉, 张朝凤, 等. 款冬花中黄酮和酚酸类成分的研究[J]. 中国中药杂志, 2010, 35(9):1143-1144.[5] 刘可越, 刘海军, 曲伟红, 等. 款冬花多酚类化学成分的研究[J]. 中成药, 2009, 31(10):1582-1584. [6] 刘可越, 刘海军, 张铁军, 等. 款冬花中萜类及甾体化合物的分离与鉴定[J]. 复旦学报（自然科学类）, 2010, 49(3):389-393. [7] 吴笛, 张朝凤, 张勉, 等. 中药款冬花的化学成分研究[J]. 中国药学杂质, 2008, 43(4):260-263. [8] 李一平, 王笃默. 款冬酮对清醒狗和失血性休克狗血流动力学的影响[J]. 药学学报, 1987, 22(7):486.[9] 应百平, 杨培明, 朱任宏, 等. 款冬花的化学成分研究Ⅰ款冬酮的结构[J]. 化学学报, 1987, 45(5):450.[10] 韩桂秋, 杨燕军, 李长龄, 等. 款冬花抗血小板活性因子活性成分的研究[J]. 北京大学学报, 1987, 19(1):33.[11] 朱自平, 张明发, 沈雅琴, 等. 款冬花的抗炎及其对消化系统作用的实验[J]. 中国中医药科技, 1998, 5(3):160. [12] 张明发, 沈雅琴. 款冬花的药理毒理研究概况[J]. 中南 药学, 2005, 3(3):165. [13] 高慧琴, 马骏, 林湘, 等. 栽培品款冬花止咳化痰作用研究[[J]. 甘肃中医学院学报, 2001, 18(4):20. [14] 张巧真, 张 燕, 等. 款冬花止咳有效部位和紫菀配伍相须部位的研究[J]. 时珍国医国药, 2009, 20(5):1042-1044. [15]光若静. 款冬花紫菀配伍止咳的物质基础及机理研究[D]. 中国药科大学硕士学位论文, 2011: 58-65.[16] 汪 玲, 光若静, 黄 芳, 等. 款冬花紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学影响[J]. 亚太传统医药, 2013, 9(6):14-17. [17] Zhen-Yu Li, Hai-Juan Zhi, Fu-Sheng Zhang, et al. Metabolomic profling of the antitussive and expectorant plant Tussilago farfara L. by nuclear magnetic resonance spectroscopy and multivariate data analysis[J]. J Pharmaceut Biomed, 2013, 75: 158-164.
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