解决问题：本课题旨在研发一种靶向CD24的单抗，阻断别吃我信号，从而诱导有效的肿瘤免疫反应而发挥肿瘤治疗作用。
通过本课题的实施，掌握单克隆抗体的制备方法及制备流程，学习单克隆抗体功能活性的研究方法，了解抗体药物研发的基本流程。
研究手段：1、CD24高表达细胞系的筛选和建立采用流式细胞分析，取对数生长期的细胞，加入荧光标记的CD24抗体，使抗原抗体充分结合后上流式细胞仪进行分析，也可进行荧光显微镜成像进行分析。
2、CD24重组蛋白的表达和纯化：（1）重组质粒的构建 （2）重组蛋白在 E.coli中进行表达和纯化 （3）对纯化后的重组蛋白进行 Western blotting检测3、CD24抗体活性检测方法的建立：采用流式细胞仪检测CD24抗体活性或间接免疫荧光法检测CD24抗体活性4、利用杂交瘤技术筛选抗CD24单抗：（1）小鼠免疫，采用ELISA进行筛选。
（2）细胞融合，培养几天后观察各个克隆的生长情况，挑选克隆进行ELISA等检测，根据检测结果将阳性克隆转移至新的24 孔板进行扩大培养。
（3）亚克隆（4）杂交瘤筛选，经过细胞融合过后，进行一次和二次亚克隆，选用阳性克隆制备抗体，对所得的纯化的抗体进行流式细胞术和细胞活性分析。
文献综述：CD24：肿瘤免疫治疗的新靶点摘要：CD24是一种低分子量高度糖基化的黏蛋白样的黏附因子，是近几年来发现并成为重要抗肿瘤治疗靶点［1-2］。
在人体正常的生理情况下，CD24分子仅在未成熟B细胞、成熟粒细胞以及少数上皮细胞和神经细胞上低水平表达;而当机体处于病理状态时，多数恶性肿瘤细胞的表面均能检测到显著高水平表达的CD24分子，其表达水平的高低与肿瘤的发生和发展密切相关。
作为细胞膜信号转导分子，CD24 还能够通过多种作用机制介导肿瘤细胞的增殖、转移和侵袭［3］。
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