一、拟研究或解决的问题CysLT1R通过网格蛋白clathrin参与调节星形胶质细胞谷氨酸循环。
二、采用研究手段1.从出生0-48h新生小鼠中,提取大脑皮质星形胶质细胞,进行体外原代培养。
2.通过慢病毒(Lentivirus-CysLT1R-EGFP)转染,使其过表达半胱胺酰白三烯受体(CysLT1R),分别给予受体激动剂、激动剂 拮抗剂、激动剂 网格蛋白clathrin小干扰RNA处理细胞。
3.通过免疫荧光(IF)和蛋白印迹(WB)检测CysLT1R在细胞浆和细胞核的分布以及谷氨酸转运体EAAT2和谷氨酰胺合成酶GS的表达水平。
三、工作安排和进度3月11日-19日 根据任务书查阅文献,撰写并提交开题报告3月20日-31日 小鼠皮质星形胶质细胞原代培养4月1日-10日 慢病毒转染,分组给药干扰处理4月11日-19日 检测CysLT1R在细胞浆、细胞核的分布情况4月20日-30日 检测EAAT2、GS的蛋白表达水平5月1日-15日 数据处理,撰写论文初稿四、文献综述1.星形胶质细胞星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多、分布最广的一类神经胶质细胞。
星形胶质细胞目前主要分为两个亚型,即原生质型和纤维型。
原生质星形胶质细胞存在于灰质中,负责大多数已知的星形胶质细胞的功能。
对纤维状星形胶质细胞研究较少。
啮齿动物典型的原生质星形胶质细胞由一个胞体、4-10个主要分支、数千个靠近突触的小枝和小叶组成。
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