课题名称：GRS通过自噬途径对小鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响
拟研究的问题：脑卒中是是危害人类健康的三大疾病之一，其中缺血性脑卒中是脑卒中的主要类型。脑缺血后血脑屏障通透性增加，进一步导致脑水肿、加重脑损伤。自噬在脑缺血再灌注损伤中是一把双刃剑，细胞适度的自噬在脑微血管内皮细胞损伤中发挥保护作用，提高自噬水平有助于维持血脑屏障的完整性。但不完全或过度自噬现象可能导致细胞死亡。本课题在经典复方生脉散治疗心脑血管疾病的基础上，获得含人参皂苷Rb1、鲁斯可皂苷元和五味子醇甲3个有效成分的新组方GRS，并证明GRS能发挥心脑缺血的保护作用。但是关于GRS在脑缺血过程中对于血脑屏障损伤的调节作用，未有研究。因此本课题拟研究GRS通过自噬途径对小鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响，并探讨其作用机制，为GRS发挥脑缺血再灌注损伤的神经保护作用提供研究基础，为GRS临床治疗缺血性脑卒中提供科学依据。
采用的研究手段：本文拟采用小鼠MCAO模型，观察自噬途径对小鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响及GRS的干预作用。
（一）GRS对脑缺血再灌注小鼠的神经保护作用
缺血1小时再灌24小时后测定脑梗塞面积、神经行为学评分，脑含水量，脑血流量等指标的影响。
（二）采用伊文思蓝染色法评价药物对脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的改善作用
在缺血1小时再灌24小时后，各组小鼠尾静脉均注射相同量的伊文思蓝染液，2小时后取脑观察各组小鼠大脑伊文思蓝染色情况及伊文思蓝的渗透量。
（三）GRS对脑缺血再灌注小鼠相关紧密连接蛋白的表达情况
在脑缺血1小时再灌注24小时后取脑提蛋白，用Western blot技术考察脑组织中紧密连接蛋白ZO-1，Occludin，claudin-5和AQP-4， MMP-9等蛋白的表达情况。
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