分子印迹-二维液相色谱用于化妆品中雌二醇的检测文献综述

 2023-01-07 02:01

课题研究的主要目的和意义:

莱克多巴胺属beta;受体激动剂,是一种人工合成的化学结构和生理功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇类衍生物,一种可用于治疗充血性心力衰竭症的强心药,还可以用于治疗肌肉萎缩症,增长肌肉,减少脂肪蓄积,并对胎儿和新生儿生长有益。美国FDA在2000年批准,可以用于动物营养重新配剂,广泛地用于畜牧业和养殖业。可以同时提高动物的日增重,提高饲料利用率,提高动物的蛋白质含量,有营养再分配的作用,能显著减少脂肪组织,提高瘦肉率,加快畜禽的生长速度,已被不少违规养殖户作为瘦肉精克伦特罗的代替品非法添加在猪饲料当中。当人们大量食用含有莱克多巴胺残留的肉类或内脏时,可能引发中毒症状,如呼吸困难、恶心、呕吐、头晕、头痛、肌肉震颤、心悸、心律失常、血压上升、促进心血管疾病,影响生殖系统等,对食用者的心脏和生殖功能具有很大的危害。因此,包括我国在内的许多国家都将其列为违禁药物。欧盟早已明确禁止在食用性动物饲料中添加包括莱克多巴胺在内的所有beta;-肾上腺素兴奋剂类药物,我国也已经于2002年明确将其列入《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》,规定禁止使用盐酸克伦特罗、克仑巴安、莱克多巴胺、沙丁胺醇等瘦肉精类物质。中华人民共和国工国家质量监督检验检疫总局发布公告,自2011年12月5日起在我国境内禁止生产和销售莱克多巴胺。

目前,国内外对于动物性食品中莱克多巴胺的检测方法主要有免疫分析法(酶联免疫法、胶体金免疫层析技术、荧光微球免疫层析技术、时间分辨荧光免疫分析技术等)、色谱分析技术(高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱一质谱法等)、传感器技术(生物传感器技术、电化学传感器技术)等。这几种方法都各有优缺点,我在查阅文献及比较各种方法之后,计划用分子印迹技术与色谱技术联合,先制备分子印迹柱,然后与C18柱建立二维液相色谱系统,检测猪肝样品中的莱克多巴胺。

分子印迹技术的原理是:当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程这种作用就会被记忆下来,当模板分子除去后,聚合物中就会形成与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴,这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。分子印迹技术具有预定性、识别性和实用性等特点,目前广泛应用于色谱技术(固相萃取前处理)、酶联免疫技术、电化学传感器技术中,对动物性食品中的莱克多巴胺进行检测。

二维液相色谱是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联起来构成的分离系统。样品经过第一维的色谱柱进入接口中,通过浓缩、捕集或切割后被切换进入第二维色谱柱及检测器中。二维液相色谱通常采用两种不同的分离机理分析样品,即利用样品的不同特性把复杂混合物(如肽)分成单一组分,这些特性包括分子尺寸、等电点、亲水性、电荷、特殊分子间作用(亲和)等,在一维分离系统中不能完全分离的组分,可能在二维系统中得到更好的分离,分离能力、分辨率得到极大的提高。完全正交的二维液相色谱,峰容量是两种一维分离模式单独运行时峰容量的乘积,即:P=P1P2P3。二维液相色谱大多使用两支或多支色谱柱,并通过柱结合技术实现样品的柱间切换。柱切换通常可分为部分和整体切换两种模式。按切割组分是否直接进入二维中,二维分离又可分为离线和在线两种方式。早期的中心切割技术,大都先在容器中收集一维洗脱产物,再进样到第二维中。随着现代仪器的发展和适应自动化分离的需要,目前二维色谱大多采用在线方式,使一维洗脱产物(部分或全部)直接进入到第二维柱系统中进行分离分析。

拟研究或解决的问题:

1.制备莱克多巴胺分子印迹整体柱,并通过优化确定最佳合成条件;

2.对合成的分子印迹整体柱理化特性予以表征;

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