一、课题研究背景利用宿主的内源性翻译机制将非天然氨基酸多肽链(Uaas)掺入蛋白质中,为天然氨基酸无法解决的问题提供了可能性。
遗传密码扩展技术可以提出和回答比以前更加深入的分子问题,而不受传统诱变分析中所使用的20种天然氨基酸的限制。
通过基于结构的工程设计和定向进化而获得的氨酰tRNA合成酶(RS)就是其中最为重要的一种工具。
它能通过ATP依赖性腺苷酸有效地识别与激活Uaas,并随后催化其转移至相关的tRNA。
迄今为止,使用这些人工进化的tRNA/RS对,已有70多个Uaas适合翻译插入细菌,酵母或哺乳动物细胞中的蛋白质中。
通过从不同生物中选择特定的适合的tRNA / RS匹配组,这些tRNA/RS对就可以在体内以正交方式发挥功能。
在一定程度上,表达宿主的天然tRNA/RS对与正交tRNA/RS对之间是否存在串扰终究是有限的。
因此正交对仍然可以在功能上与宿主的蛋白质翻译机制结合。
其中最有名的tRNA/RS对来源于詹氏甲烷球菌的tRNATyr/TyrRS对。
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