1.研究背景血管内皮生长因子受体-2 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2,VEGFR-2)存在于血管和淋巴管内皮等处，与VEGF具有高亲和力，是介导血管内皮生成的主要受体。
由于VEGFR-2的单克隆抗体与其发生特异性结合，阻断了VEGF与受体的结合，进而抑制了VEGF的促血管生长作用，因此在抗肿瘤方面发挥重要的作用。
通过基因工程开发的IgG样抗体药物结构同人体内存在的天然抗体构象非常接近，因此降低诱发免疫原性反应风险。
同时，IgG样全长抗体具有高特异性、高亲和力、体内半衰期长等特性，可以发挥更大的生物活性。
MICA 属于MIC基因家族, 位于MHC-I 类区域, 具有高度多态性, 存在多种等位基因，正常情况下仅表达于上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等表面。
MICA基因所编码分子的表达具有组织特异性,与MHC分子类似, MICA分子在机体中也发挥着一定免疫学作用, MICA 分子通过与相应受体NKG2D结合可传递活化信号, 活化T细胞、NK细胞等参与天然免疫的细胞。
本课题利用制得的IgG1样全长抗体(Mab-04)，将Mab-04的重链恒定区C末端与MICA基因通过柔性肽连接获得融合基因，并且获得重组载体，然后将轻链和重链的重组载体两组按照一定的比例，进行交叉转染，筛选获得融合抗体，利用Western blot检测融合抗体的表达，同时经Protrin A柱纯化后采用抗体夹心ELISA法定量检测融合抗体的表达，最终获得高亲和力、高靶向性的融合抗体。
2.研究内容（1）融合抗体的获得将mAb-04重链Fc段的C末端与MIC-A基因通过甘-丝氨酸柔性肽连接，获得融合抗体重链基因H，H链别与真核表达载体pMH3amp;pCA连接，获得重组载体pMH3-H和pCA-H。
将原有轻链重组载体和新构建载体两组按照一定的比例进行交叉转染哺乳动物细胞CHO-S，Dot blot鉴定，获得一次克隆和二次克隆。
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