课题名称 幽门螺旋杆菌重组脲酶基因工程菌的构建和表达研究课题性质 radic; 基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究幽门螺旋杆菌重组脲酶基因工程菌的构建和表达研究摘要：从幽门螺旋杆菌Helicobacter pylori G27基因组中克隆出脲酶基因簇，使用一步克隆法将其连接到线性化的pET-28a载体上，构建完成重组脲酶基因工程菌E.coli BL21/pET-HpUre。
重组菌经异丙基硫代半乳糖苷（Isopropyl beta;-D-Thiogalactoside）诱导后，使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证重组脲酶正常表达，发酵液菌体经超声破壁后得到具有解脲能力的重组脲酶。
关键字：幽门螺旋杆菌，脲酶，重组表达Abstract: Urease gene cluster was cloned from Helicobacter pylori G27 genome. The recombinant urease gene E.coli DH5alpha;/ pET-hPure was constructed by a one-step cloning method and was linked to a linearized pET-28a vector.After the recombinant strain was induced by Isopropyl beta;-D-thiogalactoside, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was used to verify the normal expression of recombinant urease. The recombinant urease with ureolytic ability was obtained after the fermentation broth was broken by ultrasonic.Keywords: Helicobacter pylori, urease, recombinant expression1.幽门螺旋杆菌幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori）是一种主要定值于胃上皮粘膜的革兰氏阴性菌，病理条件下也可在十二指肠中检测到。
幽门螺旋杆菌最早与二十世纪80年代被发现，但直到澳大利亚内科医生Barry Marshall服用菌体感染胃溃疡后人们才开始重视起这种细菌的危害性，Marshall也因此发现获得了诺贝尔医学奖。
现有研究表明，胃幽门螺旋杆菌是胃癌、胃溃疡和十二指肠溃疡的主要致病因子，全球每年可导致100多万人死亡【1】。
幽门螺旋杆菌主要通过空泡毒素A（vacA, vacuolating cytotoxin A）和细胞毒素相关蛋白A(cagA, cytotoxin-associated gene A)发挥致病作用。
VacA经菌体分泌排出后穿透胃上皮细胞，可在胞内产生打的酸性空泡，并通过刺激细胞的凋亡和坏死来促进细胞死亡【2】。
CagA则是被细菌主动注射到人体细胞中，干扰肌动蛋白和细胞骨架的连接，并扰乱细胞周期调节的途径【3】。
目前临床上治疗幽门螺旋杆菌感染的主流方法是使用铋剂 抗生素的联合疗法，但铋剂的使用具有一定的副作用，因此必须得到有效监管【4】。
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