虫草多糖活性组分对肾纤维化治疗的分子机理探究
课题背景:
肾脏纤维化是一种病理生理改变，是肾脏的功能由健康到损伤，再到损坏，直至功能丧失的渐进过程。肾脏由于受到创伤、感染、炎症、血循环障碍，以及免疫反应等多种致病因素刺激，其固有细胞受损，发展到后期出现大量胶原沉积和积聚，造成肾实质逐渐硬化，形成瘢痕，直至肾脏完全丧失脏器功能。肾脏内固有细胞纤维化、硬化的过程也就是肾脏纤维化的过程。肾脏纤维化是以细胞外基质（ECM）的异常沉积为特征的。虫草多糖( C o r d y c e p s p o l y s a c c h a r i d e , C P )
是虫草中含量最高的生物活性物质。虫草多糖的生理活性广泛,具有抗疲劳 、抗压力、降低血胆固醇,对多种原因引起的肾损伤具有保护作用,能明显改善肾功能 、促进肾小管的修复与再生、纠正代谢紊乱。虫草多糖的来源途径主要有以下 3种 :(1)从天然虫草子实体中提取;(2)从人工培养虫草子实体中提取;(3)从发酵培养的菌丝体和发酵液中提取。从天然虫草体中提取虫草多糖成本较高,因此实验从发酵得到的虫草菌丝体(虫草头孢菌粉)中提取虫草多糖，并考察其对体外顺铂诱导大鼠肾细胞损伤和肌注甘油诱导急性肾衰大鼠模型的保护与治疗作用。为了进一步阐明虫草多糖治疗慢性肾功能衰竭的机理，在前期研究的基础上,拟用细胞模型从RNA、蛋白质及组织水平多维动态地揭示虫草多糖在体内的信号通路及多糖的作用靶点。采用诱导因子PDGF-BB刺激HMC产生病变模型，运用MTT方法检测不同浓度。不同作用时间,PDGF-BB对细胞的过度增殖作用。
实验流程:
lt;1gt;虫草多糖的分离提取纯化,中性多糖与酸性多糖的分离
lt;2gt;虫草多糖活性片段的制备
（1）模拟人工胃液获得虫草多糖小分子活性片段（CPS-F）。
（2）测定水解产物分子量。
（3）对水解产物进行单糖组成分析。
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